略谈畜禽病的诊断

畜禽疾病的诊断实质上是对发病原因的探索,疾病的诊断过程是通过临床症状,流行病学调查、眼观病变等情况收集全面客观的资料并查阅大量文献进行对比分析得出初步诊断,或者进一步作实验室检查,并采取措施进行防治.如疾病得到控制.证明诊断是正确的。如疾病得不到控制,则应进一步调查研究,再次提出初步诊断,或再次进行实验室检查,并进行防治,直到确诊为止。即实践、认识.再实践、再认识……的认识过程。诊断疾病时要把病因分析作为诊断疾病的一个固定程序。就目前人们对疾病的外因的认识可捌分为五大类:化学因素;营养因素。在诊断时应用病因分析对疾病发生的原因进行分析,可以使诊断在更广阔的范围内进行,避免诊断的疏弱。1.
收集资料

利用感管及简单器械收集客观、全面的资料是诊断工作的重点.也是诊断工作的开始。能否对疾病进行正确的诊断,关键在于能否客观、全面的收集资料。比较全面的资料应包括:畜禽的精神、采食、饮水、体温、呼吸、心跳、运动、粪便等情况,形体的改变,有无咳嗽、怪叫,皮肤及粘膜的变化等。发病畜禽的年龄、品种、营养状况、个别发病或是群发、个别发病到群发的时间、发病率、致死率的高低、病程的长短、免疫接种与抗体监测情况,药物预防与治疗情况,病畜禽的具体表现。如有可能与必要应进行尸体剖检.剖检前应对皮肤和可视粘膜进行详细的检查。剖检时应注意皮下的变化和皮肤的断面变化。组织器官是否有出血、充血、坏死、水肿、溃疡.器官的硬度、色泽、大小,是否有结节、渗出和粘连,是否有寄生虫寄生等。2.诊断
直接的视、听、问、触等对诊断畜禽疾病发挥了并继续发挥着重要的作用,并能对一些疾病作出确切的诊断。但对某些疾病的诊断则是建立于实验室诊断的基础之上的,如传染病、原虫病等等。临床症状、流行病学调查、病理变化等成为诊断的重要依据是基于人们以往对该病通过实验室检查确诊而总结的真实材料。例如,病猪表现高热稽留、皮肤出血、浆性或脓性结膜炎,眼观病变见全身淋巴结肿大,切面呈大理石状外观.喉头、膀胱粘膜出血,肾皮质点状出血,脾、胆囊牯膜的梗死灶,回盲口附近的钮扣状溃疡,得出猪瘟的诊断是非常可靠的,这源于猪瘟确诊病例资料的全面总结。由此可见,实验室检查在畜禽疾病诊断方面的重要作用。3.
实验室检查

实验室检查是指借助一定的设备、试剂、试验动物等对疾病诊断的一种方法。在实验室诊断之前应根据所收集的系统资料提出一种或几种疾病的可能,也就是要提出检验线索,然后沿检验线索进行检验,而不是漫无边际的进行检查,这样既可减少诊断费用又可缩短检验时间。
在沿检验线索进行检验而证实一种疾病存在以后,仍应沿检验线索进行检查而不能中断,因为疾病的并发与继发时常存在。在检验线索被否定之后,应再次提出检验线索,并再次进行实验室检验,直到确诊。畜禽未注射某种疫苗。通过抗体检查可判断畜禽是否受到了某种病原的感染,但不能确定是以往感染或是目前感染。鉴别的方法是间隔一定时间,再进行抗体检查,如抗体水平是病初的2—4倍以上,可证明是目前感染,也就是说具有诊断价值。
另一种鉴别的方法是采病程较长的畜禽血清、刚发病的畜禽血清及健康畜禽的血清同时进行抗体检查,如病程较长的血清抗体较高,刚发病的畜禽血清抗体水平较低,而健康畜禽检不到抗体可判断抗体是目前感染所致。如畜禽接种过某种疫苗,则要用鉴别诊断试剂检查抗体是接种疫苗引起或是自然感染引起,但同样要区分是以往感染引起或是目前感染引起。应注意的是.畜禽感染病原后,如果抵抗力很低,有可能不产生抗体,或抗体水平低到查不到的程度。因此进行抗体检查时要有一定的检验比例或数量,以保证具有代表性。查抗体的方法较多,如微量血凝抑制试验,正向间接血凝试验、平板凝集试验、酶联免疫吸附试验、琼扩试验、抗体快速检查试纸、中和试验等。
作抗原检查,如能查到抗原的存在即说明畜禽发生了目前感染。查抗原要取抗原集中的特定新鲜组织,如扁桃体、淋巴结、脾、法氏囊、水泡皮、水泡液等.另外抗原检查应在感染的早期进行.查抗原常采用荧光抗体、琼扩试验、反向同接血凝试验、中和试验等。畜禽感染某些病原后经一定时间可出现变态反应,这一性质可用于诊断。变态反应常用于结核病、鼻疽病的诊断,如结核菌素皮内注射,结核菌素点服,鼻疽菌素皮内注射、鼻疽菌素点眼。聚合酶链反应技术可以在体外迅速、大量的扩增人们选定的一定长度的核酸序列,使少量的病毒棱酸扩增到可以检测到的程度.因此它的敏感性极高,对畜禽病毒病的诊断将发挥重要的作用。动物接种可确定某种病原是否存在,但病原对不同的动物即不同年龄的同一种动物的反应不同,因此应注意选择。
光镜镜检是检查原虫、细菌、虫卵等的直接方法.即可直接发现病原存在。镜检时病料的采集一定要无菌、全面染色一定要采用多种方法。除染色镜检外,还应作压滴镜检,另外,还要用暗场聚光镜检查。镜检要从低倍镜开始,以便发现体积较大,数量较少的病原,镜检时标本的中央和周边都要查到。电镜镜检可直接发现病毒粒子的存在,组织器官内发现某种病毒粒子即证明感染了某种病毒。因此电镜镜检对病毒病的诊断具有决定作用。电镜观察可发现病毒在细胞内的存在部位、病毒的形态、大小和结构。由于电子显微镜价格昂贵及标本制作、操作要求严格,一般实验室不进行电镜检查。对组织器官、饲料、饮水的成分分析可确定是否存在营养问题及潜在的危险,这里所指营养问题是指营养的不足和过剩。另外也可进行毒物的化验分析。4.
其他

诊断实践中如实验实检查对初步诊断反复作出否定就应当怀疑是一种新病的可能。因此,为了积累诊断资料应开展深人、广泛的流行病学调查,细心观察症状、系统的病理学检查等。采取病料进行动物接种、全面的光镜和电镜检查庸原的分离、培养、鉴定,对饲料、饮水及组织器管进行成分分析等,全方位的调查分析和检验将使新病显露出来。电脑的应用给畜禽疾病的诊断带来极大的方便。人们对疾病的初步诊断实际上是把收集到的大量客观材料与我们掌握到的疾病的资料进行对比、分析、判断的过程。但人们能够记住的资料毕竟有限,如果查阅书刊资料既不方便又缓慢,如能进行大量的资料汇总,根据症状把疾病划分,并把每种疾病的详细资料存人电脑,在诊断时把收集到的资料与电脑中存贮的全部疾病进行对比分析,即可在更加全面的基础上对疾病进行诊断。要实现这些应做到电脑中存贮的资料和临诊收集的资料应全面、准确。应注意的是,要不断充实电脑以最新的成果。

病毒核酸的检测

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1.标本的采集依据临床症状、病期及检测的目的为采取不同的标本。标本采集的原则和要求:

标本的正确采集与迅速送检是病毒感染诊断成功的关键。

2.多聚酶链反应多聚酶链反应(polyneragechainreaction,PCR)是一种体外基因扩增方法。先将目的DNA变性为单链模板,加两个人丁合成的已变性的单链DNA模板互补的引物。在DNA聚合催化下,将单核苷酸从引物3,端开始掺人,沿模板5,—)3,方向延伸,合成DNA新股。标本中只需有少量基因组DNA,经放大后即能检测出病毒序列。

澳门新葡亰平台游戏app,为了提高病毒及其成分的检出率,可对标本进行离心沉淀,即先用低速离心去沉渣,取上清液再行高速离心沉淀,这样可将病毒浓缩集中,提高检出率。

2.分离培养与鉴定由于病毒只能在活细胞内复制增殖,所以应根据病毒的不同,选择敏感动物、鸡胚或离体组织与细胞,分别进行动物接种、鸡胚接种、组织培养或细胞培养来分离培养病毒。目前,实验室最常用的是细胞培养,常用的细胞有原代细胞、二倍体肾细胞、传代细胞细胞等。病毒在细胞中增殖的指标有:①细胞病变效应。多数病毒在细胞内增殖,可引起细胞形态学改变,称为细胞病变效应。常见的病变为细胞变圆、坏死、溶解和脱落,有的细胞内出现包涵体,如狂犬病毒。②红细胞吸附现象。流感病毒和副流感病毒感染的细胞膜上出现病毒基因编码的抗原,可以与红细胞结合。若向培养瓶内加入红细胞,可见红细胞吸附于细胞膜上,这种现象称为红细胞吸附现象。

1.病毒核酸杂交技术利用双链DNA可解离和重组合的性质,将一条已知的单链DNA标记上同位素作为探针,与待检标本中的病毒核酸(与探针DNA同源或部分同源)进行核酸分子杂交,这种方法称为病毒核酸杂交技术,,此法可测病毒的DNA,也可测病毒的RNA。目前,常用的核酸交技术有斑点杂交法、Southerm吸印法和Northerm吸印法等。病毒核酸杂交技术的主要用途是:①检测血或组织细胞中的病毒核酸;②观察血清或组织细胞中病毒核酸的分子质量大小;③用于细胞内基的定位及细胞内核酸的定性与定量等+,核酸杂交技术比电镜、免疫电镜、免疫酶标等方法更为特异、敏感和快速。

标本的采集

猪病毒感染十分常见,猪病毒性感染的检查不仅用于临床确定诊断,也可用于流行病学调查,为猪病毒性疾病的预防和治疗提供科学依据。但由于猪病毒分离培养所要求的条件较高,传统的血清学检测既费时又费事,远不能满足临床需要。近年来,由于许多新技术在猪病毒学中的应用,建立了快速诊断方法,为猪病毒感染的诊断提供了方便。

病毒抗原与相应抗体的检测

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